正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
演员：汤姆·塞兹摩尔 查德·科林斯 维尼·琼斯 迪米特里·迪雅特琴科 尼尔·麦克唐纳 尤尔根·普洛斯诺 梅利亚·科尔林 理查德·塞梅尔 阿拉斯塔尔·麦肯泽 阿塔纳斯·斯雷布雷夫 萨姆·斯普卢尔 维利贝·托皮奇
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演员：杰米·福克斯 约瑟夫·高登-莱维特 多米尼克·菲什巴克 罗德里戈·桑托罗 考特尼·万斯 艾米·兰德克 机关枪凯利 泰特·弗莱彻 阿伦·马尔多纳多 安德烈·沃德·哈蒙德 可亚娜·西蒙妮·辛普森 C.J.勒布朗 CG刘易斯 约瑟夫·波利昆 雅茨·德·利瑟尔 凯西·奈斯泰德 珍妮特·罗斯·阮 吉姆·克洛克 乔恩·阿兹 戴恩·罗兹 怀尔德·韦恩 贾斯汀·贾木什 戈登·德克海默 卢克·霍克斯 彼得·詹梅斯 托尼·查普曼·斯蒂尔 约书亚·萨达索
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